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TransformaĆ§Ć£o Natural em Arcobacter butzleri
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Orientador(es)
Resumo(s)
Arcobacter butzleri Ć©, dentro do gĆ©nero Arcobacter, a espĆ©cie mais frequentemente associada a quadros diarreicos em humanos, bem como a alguns casos de bacteriemias. A. butzleri demonstra uma elevada diversidade genĆ©tica, o que poderĆ” contribuir para o aumento da sua capacidade adaptativa aos diferentes ambientes onde pode ser encontrado. Um dos mecanismos que contribui para a diversidade genĆ©tica, poderĆ” ser a transferĆŖncia horizontal de genes, atravĆ©s do processo de transformaĆ§Ć£o natural, que Ć© caracterizado pela absorĆ§Ć£o, incorporaĆ§Ć£o e expressĆ£o funcional de DNA exĆ³geno, e que pode ocorrer em condiƧƵes normais de crescimento. Assim, de modo a esclarecer se A. butzleri Ć© naturalmente competente para transformaĆ§Ć£o e quais os fatores que influenciam este processo, foram testados diferentes protocolos de transformaĆ§Ć£o, com a utilizaĆ§Ć£o de DNA exĆ³geno e isogĆ©nico contendo marcas de resistĆŖncia a antibiĆ³ticos. Foi possĆvel verificar neste trabalho que quatro das cinco estirpes de A. butzleri estudadas foram naturalmente transformĆ”veis, com uma frequĆŖncia de transformaĆ§Ć£o mĆ”xima obtida de 10-5 transformantes por cĆ©lula recetora, obtida apĆ³s 5 dias de incubaĆ§Ć£o. Confirmou-se ainda que a competĆŖncia se mantĆ©m desde a fase exponencial Ć fase estacionĆ”ria de crescimento, e as melhores condiƧƵes de transformaĆ§Ć£o demonstraram ser a utilizaĆ§Ć£o de 1 Ī¼g de DNA isogĆ©nico, com incubaĆ§Ć£o a 30Ā°C e sob uma atmosfera de microaerofilia. A. butzleri tambĆ©m demonstrou favorecer a incorporaĆ§Ć£o de material genĆ©tico da sua estirpe/espĆ©cie. Observou-se ainda que o processo de incorporaĆ§Ć£o de gDNA ocorre logo apĆ³s a sua adiĆ§Ć£o. Finalmente, verificou-se que A. butzleri tem a capacidade de trocar material genĆ©tico em coculturas. Em suma, a transferĆŖncia horizontal de genes mediada por transformaĆ§Ć£o natural Ć© provavelmente um dos processos que contribui para a diversidade genĆ©tica em A. butzleri, sendo que esta ferramenta pode ser usada para estudos genĆ©ticos desta espĆ©cie.
DescriĆ§Ć£o
Palavras-chave
Arcobacter butzleri transformaĆ§Ć£o natural transferĆŖncia horizontal de genes