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Publicação
Estudo da foto-intercalação do 4’,7-dihidroxiflavílio em polinucleótidos e da especificidade dessa interacção
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Orientador(es)
Resumo(s)
O trabalho realizado tem como objectivo o estudo da foto-intercalação de flavílios em polinucleótidos e avaliar como varia a interacção com polinucleótidos de diferentes composições e estruturas. O flavílio utilizado neste estudo foi o 4’,7-dihidroxiflavílio e os polinucleótidos usados para avaliar a interacção foram ct-DNA, poli(A:U), e poli(G:C).
O estudo foi feito por espectroscopia de absorção UV-visível, fluorescência de estado estacionário e anisotropia de fluorescência. Os resultados demonstram que não há interacção dos nucleótidos com a forma chalcona, mas apenas após fotoconversão desta espécie em catião flavílio. Mesmo antes de irradiar a solução a presença de nucleótidos desvia o equilíbrio entre as formas em solução favorecendo a formação de catião, uma evidência para a estabilidade do aducto formado apenas com o catião. Além disto, o efeito de estabilização do catião pode ser visto por espectroscopia de emissão, onde uma redução da emissão da chalcona a cerca de 500 nm é acompanhada por um aumento da emissão de catião e base quinoidal (em equilíbrio com o catião no estado excitado).
As medições de anisotropia de fluorescência do catião flavílio e da base quinoidal na presença dos diferentes polinucleótidos apontam que todos eles causam uma redução de anisotropia de fluorescência do catião, compatível com uma variação do seu tempo de vida (aumento) após intercalação.
Os resultados do estudo indicam que o 4’,7-dihidroxiflavílio realmente interage com os diversos polinucleótidos e, através de medições tanto de absorvância como de emissão, é possível verificar a presença dessas moléculas usando este flavílio como sonda, dadas as significativas variações espectrais causadas pela interacção entre ambos.
Descrição
Palavras-chave
flavílios fotointercalação DNA RNA espectroscopia