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Publicação
Saliva Biofluid Screening of Potential Stress Biomarkers for Health Diagnosis
| Nome: | Descrição: | Tamanho: | Formato: | |
|---|---|---|---|---|
| 4.52 MB | Adobe PDF |
Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Nowadays, biomarkers are widely used for diagnosis, allowing information about human health
and well-being. In addition to blood, other fluids have been the subject of interest, such as sweat, tears
and saliva, as they are less invasive and more practical methods. For biochemical evaluations, saliva
represents an attractive medium, but still relatively little explored, and therefore time should be devoted
to its study. The main objective of the project is to identify potential non-protein salivary biomarkers
useful for the assessment of human health, more specifically with regard to stress monitoring.
A set of 11 small molecules (acetylcholine, dopamine, epinephrine, norepinephrine, glutamic
acid, serotonin, tyrosine, tryptophan, ascorbic acid, lactic acid, and cortisol) was selected for their po-
tential as relevant biomarkers for identifying stress in humans. These molecules were analysed using
analytical chromatographic tools, specifically the liquid chromatography coupled with TANDEM mass
spectrometry. To determine which of these molecules could be identified in saliva, samples were col-
lected from 24 healthy individuals, comprising 12 men and 12 women under the age of 30. The samples
were analysed using LC-MS/MS, successfully identifying and quantifying acetylcholine, dopamine,
epinephrine, norepinephrine, glutamic acid, tyrosine, tryptophan, ascorbic acid, and cortisol in saliva.
Lactic acid could not be quantified due to sampling limitations.
Electrochemical analysis of the saliva samples was also performed using screen-printed elec-
trodes (SPEs) and the techniques of cyclic voltammetry (CV) and differential pulse voltammetry (DPV),
allowing the identification of three regions where the biomarkers under study could be detected. The
pH of the samples was also measured.
Atualmente, os biomarcadores são amplamente utilizados para diagnóstico, permitindo obter informa- ções sobre a saúde e o bem-estar humano. Além do sangue, outros fluidos têm sido alvo de interesse, como o suor, as lágrimas e a saliva, por serem métodos menos invasivos e mais práticos. Para avaliações bioquímicas, a saliva representa um meio atrativo, mas ainda relativamente pouco explorado, devendo, portanto, ser dedicado tempo ao seu estudo. O principal objetivo do projeto é a identificação de poten- ciais biomarcadores salivares não proteicos úteis para a avaliação da saúde humana, mais especifica- mente no que se refere à monotorização do stress. Foi escolhido um conjunto de 11 moléculas pequenas (acetilcolina, dopamina, epinefrina, norepinefrina, ácido glutâmico, serotonina, tirosina, triptofano, ácido ascórbico, ácido láctico e cortisol) com o poten- cial de serem biomarcadores relevantes da identificação do stress nos humanos. As mesmas foram ana- lisadas através de ferramentas cromatográficas analíticas, mais especificamente recorrendo à cromato- grafia líquida acopolada à espetrometria de massa TANDEM (LC-MS/MS). De forma a se perceber quais destas moléculas se podiam identificar na saliva, foram recolhidas amostras de saliva de 24 indi- víduos saudáveis, 12 homens e 12 mulheres com menos de 30 anos. As mesmas foram analisadas com recurso ao LC-MS/MS, conseguindo-se identificar e quantificar na saliva a acetilcolina, dopamina, epi- nefrina, norepinefrina, ácido glutâmico, tirosina, triptofano, ácido ascórbico e cortisol. O ácido lácteo não foi possível de quantificar devido a limitações de amostragem. Foi também realizada uma análise eletroquímica das amostras de saliva, com recurso a SPEs (screen- printed electrodes) utilizando as técnicas de CV (voltametria cíclica) e DPV (voltametria de pulso diferen- cial), sendo possível a identificação de 3 zonas onde existe a possibilidade de se encontrarem os biomar- cadores em estudo. A leitura do pH das amostras foi também efetuada.
Atualmente, os biomarcadores são amplamente utilizados para diagnóstico, permitindo obter informa- ções sobre a saúde e o bem-estar humano. Além do sangue, outros fluidos têm sido alvo de interesse, como o suor, as lágrimas e a saliva, por serem métodos menos invasivos e mais práticos. Para avaliações bioquímicas, a saliva representa um meio atrativo, mas ainda relativamente pouco explorado, devendo, portanto, ser dedicado tempo ao seu estudo. O principal objetivo do projeto é a identificação de poten- ciais biomarcadores salivares não proteicos úteis para a avaliação da saúde humana, mais especifica- mente no que se refere à monotorização do stress. Foi escolhido um conjunto de 11 moléculas pequenas (acetilcolina, dopamina, epinefrina, norepinefrina, ácido glutâmico, serotonina, tirosina, triptofano, ácido ascórbico, ácido láctico e cortisol) com o poten- cial de serem biomarcadores relevantes da identificação do stress nos humanos. As mesmas foram ana- lisadas através de ferramentas cromatográficas analíticas, mais especificamente recorrendo à cromato- grafia líquida acopolada à espetrometria de massa TANDEM (LC-MS/MS). De forma a se perceber quais destas moléculas se podiam identificar na saliva, foram recolhidas amostras de saliva de 24 indi- víduos saudáveis, 12 homens e 12 mulheres com menos de 30 anos. As mesmas foram analisadas com recurso ao LC-MS/MS, conseguindo-se identificar e quantificar na saliva a acetilcolina, dopamina, epi- nefrina, norepinefrina, ácido glutâmico, tirosina, triptofano, ácido ascórbico e cortisol. O ácido lácteo não foi possível de quantificar devido a limitações de amostragem. Foi também realizada uma análise eletroquímica das amostras de saliva, com recurso a SPEs (screen- printed electrodes) utilizando as técnicas de CV (voltametria cíclica) e DPV (voltametria de pulso diferen- cial), sendo possível a identificação de 3 zonas onde existe a possibilidade de se encontrarem os biomar- cadores em estudo. A leitura do pH das amostras foi também efetuada.
Descrição
Palavras-chave
Biomarkers saliva stress LC-MS/MS electrochemical techniques biosensor