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Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) have the unique potential of self-renewal and the
functional capacity to give rise to any specialized cell type in the human body, including all types
of renal cells. By virtue of these outstanding features, hiPSCs constitute a powerful research tool
and present an immensurable clinical potential. Kidney organoids derived from hiPSCs constitute
attractive three-dimensional (3D) models that may enable kidney regeneration, disease modelling
and drug screening, amongst others.
The following experimental work focused on developing kidney organoids from hiPSCs under
3D conditions resorting to commercially available high-throughput microwells. For that purpose,
two relevant protocols, which combine monolayer and 3D culture, were applied and adapted to a
full 3D culture configuration. The conducted differentiation experiments under 3D conditions
revealed temporal discrepancy of the obtained cellular stages in relation to the referred protocols.
In the end, it was possible to generate immature kidney organoids.
As células estaminais pluripotentes induzidas humanas (hiPSCs) têm o potencial único de autorrenovação e a capacidade funcional de originar qualquer tipo de célula especializada no corpo humano, incluindo todos os tipos de células renais. Em virtude destas características excecionais, as hiPSCs são um poderoso instrumento de pesquisa e apresentam um potencial clínico imensurável. Os organóides de rim derivados de hiPSCs constituem modelos tridimensionais (3D) atrativos que podem permitir a regeneração do rim, modelação de doenças e triagem de fármacos, entre outros. O seguinte trabalho experimental focou-se no desenvolvimento de organóides de rim a partir de hiPSCs sob condições 3D recorrendo a uma metodologia high-throughput através do uso de micropoços. Com esse propósito, dois protocolos relevantes, que combinam cultura em condições aderentes e cultura 3D, foram aplicados e adaptados a uma configuração de cultura totalmente em condições 3D. As experiências de diferenciação conduzidas sob condições 3D revelaram uma discrepância temporal dos estágios celulares obtidos em relação aos protocolos referidos. No final, foi possível gerar organóides de rim imaturos.
As células estaminais pluripotentes induzidas humanas (hiPSCs) têm o potencial único de autorrenovação e a capacidade funcional de originar qualquer tipo de célula especializada no corpo humano, incluindo todos os tipos de células renais. Em virtude destas características excecionais, as hiPSCs são um poderoso instrumento de pesquisa e apresentam um potencial clínico imensurável. Os organóides de rim derivados de hiPSCs constituem modelos tridimensionais (3D) atrativos que podem permitir a regeneração do rim, modelação de doenças e triagem de fármacos, entre outros. O seguinte trabalho experimental focou-se no desenvolvimento de organóides de rim a partir de hiPSCs sob condições 3D recorrendo a uma metodologia high-throughput através do uso de micropoços. Com esse propósito, dois protocolos relevantes, que combinam cultura em condições aderentes e cultura 3D, foram aplicados e adaptados a uma configuração de cultura totalmente em condições 3D. As experiências de diferenciação conduzidas sob condições 3D revelaram uma discrepância temporal dos estágios celulares obtidos em relação aos protocolos referidos. No final, foi possível gerar organóides de rim imaturos.
Descrição
Palavras-chave
Human induced pluripotent stem cells Renal differentiation Kidney organoids 3D culture
