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Publicação
Caracterização de Cutinase imobilizada em matriz de sol-gel
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Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Neste trabalho procedeu-se a alterações na sequência de aminoácidos da cutinase. Obtiveramse
os mutantes E.Coli (células WK6) L189W e E.Coli N84W-L182C.
Efectuaram-se crescimentos celulares, tendo-se obtido:
Tabela 1 – Massa total de cutinase obtida nas produções e respectiva pureza.
N84W-L182C L189W
Massa total (mg) 211 44
Pureza (%) ~60 ~55
Realizou-se ainda a caracterização de cutinase imobilizada em sol-gel de composição
TMOS/MTMS, TMOS/ETMS, TMOS/PTMS e TMOS/BTMS, recorrendo às técnicas de
espectroscopia de fluorescência e anisotropia.
A adição de um grupo cisteína na posição 182 ao mutante N84W (mutante N84W-L182C)
aproximou a resposta de intensidade de fluorescência e λmax à cutinase nativa.
O mutante L189W mostrou-se semelhante à cutinase nativa.
A análise da anisotropia foi inconclusiva, devido a desnaturação da cutinase (mutante e
nativa).
Os dados experimentais recolhidos não foram suficientes para esclarecer na totalidade as
interacções entre cutinase e matriz de sol-gel.
Descrição
Dissertação apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de
Lisboa para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em
Biotecnologia