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CaracterizaĆ§Ć£o de Cutinase imobilizada em matriz de sol-gel
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Orientador(es)
Resumo(s)
Neste trabalho procedeu-se a alteraƧƵes na sequĆŖncia de aminoĆ”cidos da cutinase. Obtiveramse
os mutantes E.Coli (cƩlulas WK6) L189W e E.Coli N84W-L182C.
Efectuaram-se crescimentos celulares, tendo-se obtido:
Tabela 1 ā Massa total de cutinase obtida nas produƧƵes e respectiva pureza.
N84W-L182C L189W
Massa total (mg) 211 44
Pureza (%) ~60 ~55
Realizou-se ainda a caracterizaĆ§Ć£o de cutinase imobilizada em sol-gel de composiĆ§Ć£o
TMOS/MTMS, TMOS/ETMS, TMOS/PTMS e TMOS/BTMS, recorrendo Ć s tĆ©cnicas de
espectroscopia de fluorescĆŖncia e anisotropia.
A adiĆ§Ć£o de um grupo cisteĆna na posiĆ§Ć£o 182 ao mutante N84W (mutante N84W-L182C)
aproximou a resposta de intensidade de fluorescĆŖncia e Ī»max Ć cutinase nativa.
O mutante L189W mostrou-se semelhante Ć cutinase nativa.
A anĆ”lise da anisotropia foi inconclusiva, devido a desnaturaĆ§Ć£o da cutinase (mutante e
nativa).
Os dados experimentais recolhidos nĆ£o foram suficientes para esclarecer na totalidade as
interacƧƵes entre cutinase e matriz de sol-gel.
DescriĆ§Ć£o
DissertaĆ§Ć£o apresentada Ć Faculdade de CiĆŖncias e Tecnologia da Universidade Nova de
Lisboa para cumprimento dos requisitos necessĆ”rios Ć obtenĆ§Ć£o do grau de Mestre em
Biotecnologia