Utilize este identificador para referenciar este registo: http://hdl.handle.net/10362/8492
Título: Caracterização in vitro de siRNAs ionicamente modificados
Autor: Silva, Sónia Alexandra Pereira da
Orientador: Fernandes, Maria Alexandra
Nogueira, Isabel
Vidinha, Pedro
Palavras-chave: RNA não codificantes
RNA de interferência
siRNA
Líquidos iónicos
Terapia génica
Data de Defesa: 2012
Editora: Faculdade de Ciências e Tecnologia
Resumo: O RNA de interferência (RNAi) é um mecanismo celular que através de pequenas moléculas de RNA de interferência (siRNA) promove o silenciamento pós-transcricional de genes. Os siRNA são moléculas com 20 – 25 pares de bases que nos últimos anos se têm assumido como potenciais agentes terapêuticos para silenciar genes associados a doenças em humanos. No entanto, têm-se interposto algumas barreiras fisiológicas que têm limitado o uso de siRNA na prática clínica. Um dos grandes obstáculos encontrados no uso destas moléculas como agentes terapêuticos é a sua grande instabilidade, pelo que, neste projeto, se considerou a utilização de nucleótidos ionicamente modificados para a síntese in vitro de siRNAs. Este trabalho tinha como principal objetivo caracterizar in vitro siRNAs ionicamente modificados. Os resultados obtidos mostraram ser possível obter moléculas de siRNAs com elevado grau de pureza o que nos levou a transfetar os siRNAs em células MCF-7 que expressam constitutivamente o gene eGFP. A eficiência de silenciamento dos siRNAs modificados e não modificados foi avaliada por microscopia de fluorescência e por espectrofluorimetria, tendo-se verificado que o nível de silenciamento promovido pelas moléculas testadas era muito semelhante. Além disso, estudos de viabilidade celular permitiram inferir que os siRNAs testados não promoviam citotoxicidade nas células transfetadas. Com este trabalho espera-se contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias que permitam a implementação de siRNAs ionicamente modificados como medida terapêutica mais eficaz, estável e económica.
Descrição: Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina
URI: http://hdl.handle.net/10362/8492
Aparece nas colecções:FCT: DCV - Dissertações de Mestrado

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