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Publicação
Avaliação do papel da proteína ATR na indução de autofagia e senescência por Temozolomida em células de glioblastoma
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Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Autofagia é um processo de degradação fisiológico aumentado em diferentes
condições de estresse, em que proteínas e organelas não funcionais são
direcionadas ao lisossomo, onde são degradadas e os produtos da degradação
reutilizados pela célula. Senescência é o processo em que as células param de
dividir e entram em um estado de parada celular irreversível. Os dois processos,
autofagia e senescência, podem ser induzidos na presença de dano no DNA,
porém a maquinaria molecular que realiza a intermediação neste processo ainda
é incerta. Temozolomida (TMZ) é um agente alquilante, usado para tratar
pacientes com Glioblastoma, que induz dano no DNA. Lesões produzidas por
TMZ ativam a resposta ao dano no DNA (DDR), uma sinalização complexa que
medeia as respostas celulares, tais como a dinâmica do ciclo celular, autofagia,
senescência e morte celular, ao dano genotóxico. Dada a importância desses
mecanismos, esse trabalho objetiva avaliar o impacto da inibição da cinase Ataxia
Telangiectasia mutada dependente de Rad3 (ATR), reguladora chave da DDR, na
proliferação, autofagia e senescência em células de glioblastoma tratadas com
TMZ. Para tal, nós utilizamos um inibidor farmacológico para ATR (VE-821), bem
como shRNA para ATR com vetor lentiviral em células U87. A inibição
farmacológica da proteína ATR não alterou o estado autofágico e de senescência
em comparação com as células tratadas somente com TMZ. Esses resultados
foram obtidos usando o método Laranja de Acridina (AO) e a ferramenta de
Análise Morfométrica Nuclear (NMA). Na ausência de uma sinalização
dependente de ATR, obtida pelas células shATR tratadas com TMZ, também não
observamos alteração significativa em relação a esses processos. No entanto,
nós observamos um acúmulo da proteína SQSTM1/p62, substrato da autofagia,
nas células silenciadas para ATR. Esta alteração não se refletiu em aumento de
foci intracelulares da proteína SQSTM1/p62. Em conclusão, ATR não parece
participar diretamente da ativação da Autofagia e da Senescência induzidas por
TMZ.
Descrição
UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL
Centro de Biotecnologia
Programa de Pós Graduação em Biologia Celular e Molecular – PPGBCM
Tese arquivada ao abrigo da Portaria nº227/2017 de 25 de julho.
Tese arquivada ao abrigo da Portaria nº227/2017 de 25 de julho.