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Variation of venom composition and toxicity in weever fishes (Trachinidae). Implications for biomedicine and biotechnology

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Resumo(s)

Blue Biotechnology, also known as marine biotechnology, is a specialized area within biotech- nology that focuses on the exploration and exploitation of marine resources to develop new products and technologies, that eventually can be used and applied in a variety of different areas reaching from pharmaceuticals and personal care products to aquaculture. Despite the interest on venoms for drug discovery, only recently have fish venoms caught the attention of biotechnologists. Indeed, only a few species have so far been studied in detail. One of those species native to our homeland coast is the lesser weever fish (Echiichthys vipera) which is responsible for one of the most painful stings from all animal kingdom. This thesis aims to contribute to the investigation of the main venom apparatus of the weever fish, where venom production takes place and the way envenomation occurs, as well as identify the most im- portant proteinaceous toxins present in weever fish venom as well as locate, isolate, sequence and quantitate the expression levels mRNAs coding for these toxins per sex of fish. Histology revealed the morphology of the venom glands responsible for venom production in both dorsal and opercular spines. In addition, two proteinaceous toxins present in the venom were identi- fied, an alfa and a beta subunit of a cytolytic pore-forming toxin also known as cytolysin. Quan- titative RT-PCR analysis showed that there was a significant increase in the expression of those subunits in the venomous dorsal and opercular spines compared to the soft rays, but there was no evidence found for a difference in expression between males and females
A Biotecnologia Azul, também conhecida como biotecnologia marinha, é uma área especiali- zada dentro da biotecnologia que se concentra na exploração e aproveitamento de recursos marinhos para desenvolver novos produtos e tecnologias, que eventualmente podem ser usa- dos e aplicados em uma variedade de áreas diferentes, atingindo desde produtos farmacêu- ticos e produtos de higiene pessoal até a aquicultura. Apesar do interesse nos venenos para a descoberta de medicamentos, só recentemente os venenos de peixes chamaram a atenção dos biotecnologos. Na verdade, apenas algumas espécies foram até agora estudadas em detalhe. Uma dessas espécies nativas da costa da nossa terra natal é o peixe-aranha (Echiichthys vipera), responsável por uma das picadas mais dolorosas de todo o reino animal. Esta tese visa contribuir para a investigação do principal aparelho venenoso do peixe-aranha, onde ocorre a produção de veneno e a forma como ocorre o envenenamento, bem como identificar as toxinas proteicas mais importantes presentes no veneno do peixe-aranha, tal como localizar, isolar, sequenciar e quantificar os níveis de expressão de mRNAs que codifi- cam essas toxinas por sexo dos peixes. A histologia revelou a morfologia das glândulas de veneno responsáveis pela produção de veneno nas espinhas dorsal e opercular. Além disso, foram identificadas duas toxinas proteicas presentes no veneno, uma subunidade alfa e uma subunidade beta de uma toxina citolítica formadora de poros, também conhecida como citoli- sina. A análise quantitativa por RT-PCR mostrou que houve um aumento significativo na ex- pressão dessas subunidades nos espinhos venenosos dorsais e operculares em comparação com os raios moles, mas não foram encontradas evidências da diferença na expressão entre machos e fêmeas.

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Palavras-chave

Lesser weever fish Blue Biotechnology Cytolysin Venom Gene expression

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