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Publicação
Gold nanoparticles for iRNA: inhibition of intercellular communication mediated by cancer cells derived exosomes
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Orientador(es)
Resumo(s)
Inter-cellular communication has been associated with the transference of molecular information mediated by exosomes, which is particularly relevant in cancer metastasis. Exosomes’ integrin α6β1 and α6β4, overexpressed in breast cancer, specifically bind to fibroblasts and epithelial cells in the lung, activating tyrosine-protein kinase (Src) and upregulating pro-inflammatory S100 genes. This interaction will ultimately promote lung tropic metastasis. Herein, we used antisense oligonucleotides (ASO) vectorized by gold nanoparticles to silence the ITGA6 gene, which codifies for the α6 integrin, in the breast adenocarcinoma cell lines. Subsequently, the internalization of the exosomes secreted by the silenced cells (primary cells) was examined in secondary cells. The downregulation of ITGA6 gene and protein in cells and exosomes was assessed by RT-qPCR, Western Blot and ELISA, respectively. Internalization of those exosomes
by secondary cells will be evaluated to understand the effect of integrin silencing in tumor progression and in the formation of metastasis.
A comunicação intercelular tem sido associada à transferência de informação molecular medi- ada por exossomas, o que é particularmente relevante no processo de metastização cancerí- gena. As integrinas α6β1 e α6β4 dos exossomas, que se encontram expressas de forma exacerbada em cancro da mama, ligam-se especificamente a fibroblastos e células epiteliais no pulmão, ativando tirosina-proteína quinase (Src) e regulando positivamente genes S100 pró-inflamatórios. Essa interação acabará por promover metástases pulmonares trópicas. Aqui, usamos oligonucleotídeos antisense (ASO) vetorizados por nanopartículas de ouro para silen- ciar o gene ITGA6, que codifica para a integrina α6, nas linhas celulares de adenocarcinoma de mama. Posteriormente, a internalização dos exossomas secretados pelas células silenciadas (células primárias) foi examinada em células secundárias. A regulação negativa do gene e pro- teína ITGA6 em células e exossomas foi avaliada por RT-qPCR, Western Blot e ELISA, respeti- vamente. A internalização desses exossomas por células secundárias será avaliada para enten- der o efeito do silenciamento de integrinas na progressão tumoral e na formação de metásta- ses.
A comunicação intercelular tem sido associada à transferência de informação molecular medi- ada por exossomas, o que é particularmente relevante no processo de metastização cancerí- gena. As integrinas α6β1 e α6β4 dos exossomas, que se encontram expressas de forma exacerbada em cancro da mama, ligam-se especificamente a fibroblastos e células epiteliais no pulmão, ativando tirosina-proteína quinase (Src) e regulando positivamente genes S100 pró-inflamatórios. Essa interação acabará por promover metástases pulmonares trópicas. Aqui, usamos oligonucleotídeos antisense (ASO) vetorizados por nanopartículas de ouro para silen- ciar o gene ITGA6, que codifica para a integrina α6, nas linhas celulares de adenocarcinoma de mama. Posteriormente, a internalização dos exossomas secretados pelas células silenciadas (células primárias) foi examinada em células secundárias. A regulação negativa do gene e pro- teína ITGA6 em células e exossomas foi avaliada por RT-qPCR, Western Blot e ELISA, respeti- vamente. A internalização desses exossomas por células secundárias será avaliada para enten- der o efeito do silenciamento de integrinas na progressão tumoral e na formação de metásta- ses.
Descrição
Palavras-chave
metastasis organotropism breast cancer exosomes