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Publicação
Resistive Pulse Nanopore Sensing of Nanoparticles – Steps towards physical detection of viruses
| Nome: | Descrição: | Tamanho: | Formato: | |
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Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Molecular diagnostics (MDx) provides well established and highly sensitive assays for the detection of pathogens widely used in modern clinics. However, as the on-going pandemic of Covid-19 has shown MDx has number of limitations, when addressing the needs of population wide screening, such as slow speed, com-plexity of sample collection and handling, production and distribution of reagents and overall cost. Therefore, finding new approaches for the detection of viruses would be a great importance in the context of both current and future pandemics. One of these approaches is Resistive pulse sensing (RPS). RPS is characterization tech-nique that obtains information about physical properties of nanoparticles by analyzing the variation in ionic current caused by a particle when traversing a pore.
In this study we have explored RPS for the detection and characterization of physical properties of nanoparticles with similar diameters to that of SARS-CoV-2 virus. First, we characterized different nanopore chip designs having several types and sizes of constrictions using polystyrene model particles to mimic viruses. We used various sizes and concentrations of particles, with different buffer compositions and electrical volt-ages. Thereafter exhaled breath condensate was evaluated as possible sample matrix and liposomes were ex-ploited as an alternative safe model system. Data was analyzed for the RPS pulse shapes and frequencies and for the success rate of different combinations of experimental settings.
This characterization serves as an important basis for further development of the RPS based assays.
Técnicas de diagnóstico molecular (TDM) são métodos comprovados e de alta sensibilidade, utilizados para a deteção de patogénicos em hospitais e clínicas. No entanto, a atual pandemia de Covid-19 revelou que as TDM possuem limitações no que diz respeito á testagem geral da população, nomeadamente na complexi-dade da recolha e tratamento de amostras, produção e distribuição de reagentes e custo geral. Logo, procurar novos métodos para a deteção de vírus seria de grande importância no contexto da atual e futuras pandemias. O método estudado nesta tese foi a Deteção de Pulso Resistivo (DPR). DPR é uma técnica de caracterização que obtém informação sobre as propriedades físicas das nanopartículas ao analisar a variação na corrente iónica causada pelas mesmas quando atravessam um nanoporo. Neste estudo, foi explorado o método de Deteção de Pulso Resistivo (DPR) para a deteção e caracteri-zação de propriedades físicas de nanopartículas. Primeiro, caracterizámos diferentes designs de chips com diferentes tipos e dimensões de constrições, utilizando partículas modelo de polistireno para simular partículas virais. Utilizamos diferentes tamanhos e concentrações de partículas, soluções tampão de diferentes composi-ções e aplicámos diferente tensões elétricas. Em seguida, ar exalado condensado foi estudado como uma pos-sível matriz e lipossomas foram utilizados como uma alternativa segura para simulação do vírus. Esta caracterização serve como uma base importante para futuros estudos baseados no sistema DPR.
Técnicas de diagnóstico molecular (TDM) são métodos comprovados e de alta sensibilidade, utilizados para a deteção de patogénicos em hospitais e clínicas. No entanto, a atual pandemia de Covid-19 revelou que as TDM possuem limitações no que diz respeito á testagem geral da população, nomeadamente na complexi-dade da recolha e tratamento de amostras, produção e distribuição de reagentes e custo geral. Logo, procurar novos métodos para a deteção de vírus seria de grande importância no contexto da atual e futuras pandemias. O método estudado nesta tese foi a Deteção de Pulso Resistivo (DPR). DPR é uma técnica de caracterização que obtém informação sobre as propriedades físicas das nanopartículas ao analisar a variação na corrente iónica causada pelas mesmas quando atravessam um nanoporo. Neste estudo, foi explorado o método de Deteção de Pulso Resistivo (DPR) para a deteção e caracteri-zação de propriedades físicas de nanopartículas. Primeiro, caracterizámos diferentes designs de chips com diferentes tipos e dimensões de constrições, utilizando partículas modelo de polistireno para simular partículas virais. Utilizamos diferentes tamanhos e concentrações de partículas, soluções tampão de diferentes composi-ções e aplicámos diferente tensões elétricas. Em seguida, ar exalado condensado foi estudado como uma pos-sível matriz e lipossomas foram utilizados como uma alternativa segura para simulação do vírus. Esta caracterização serve como uma base importante para futuros estudos baseados no sistema DPR.
Descrição
Palavras-chave
Nanoparticles Virus Resistive Pulse Sensing