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Publicação
Desenvolvimento e validação do ensaio de mutagenicidade em células de mamífero, Mouse Lymphoma Assay
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Orientador(es)
Resumo(s)
Os alimentos são essenciais à vida, e por isso a sua segurança e qualidade é de extrema importância, sendo avaliada em toda a cadeia alimentar seguindo o lema da Comissão Europeia (CE) ‘’From the farm to the fork’’, em português, ‘’Do prado ao prato’’. A CE tem alguns objetivos que pretende ver cumpridos até 2030, incluindo o de reduzir em 50% a utilização e o risco de pesticidas.
Assim, os produtos utilizados para proteção de plantas estão sujeitos a uma legislação apertada que obriga à realização de diversos estudos para que estes possam ser registados e comercializados. Uma das vertentes em que são avaliados, tanto os ingredientes ativos, como as impurezas provenientes do seu processo de fabrico ou os metabolitos encontrados no ambiente como produto da sua degradação, diz respeito à sua genotoxicidade.
O potencial genotóxico e/ou mutagénico de um composto é avaliado in vitro pelo ensaio de Ames em bactérias, o ensaio de micronúcleos (MN), o ensaio de aberrações cromossómicas (CA) e o ensaio de mutagenicidade em células de mamífero (Cell Gene Mutation - CGM).
Esta dissertação foi elaborada no Laboratório de Microbiologia e Biologia Celular integrado na ASCENZA AGRO, que por sua vez faz parte do grupo Rovensa. A ASCENZA AGRO tem uma longa experiência no setor da Proteção de Culturas, principalmente pela produção de fungicidas, inseticidas e herbicidas. Para além da produção, é suportada por Laboratórios de Qualidade, Físico-Química, Síntese, Resíduos de Pesticidas, Ensaios de Campo e o Laboratório de Microbiologia e Biologia Celular, de forma a avaliar os seus produtos.
O trabalho consistiu na execução de ensaios para validação e implementação do método para o ensaio de mutagenicidade em células de mamífero, desenvolvido no âmbito das Boas Práticas de Laboratório. Foram realizados dois estudos, um estudo de otimização e um ensaio de validação. O estudo de otimização consistiu em dois ensaios de 4 horas de exposição sem S9, um ensaio de 4 horas de exposição com S9 e um ensaio de 24 horas. O estudo de validação foi apenas composto por um ensaio de 4H.
Food is essential to life, and therefore its safety and quality is extremely important, being evaluated throughout the food chain following the European Commission (EC) maxim ''From the farm to the fork''. The EC has some goals it wants to see acomplished by 2030, including reducing pesticide use and risk by 50%. Thus, products used for plant protection are subject to various legislations that require several studies so that they can be registered and commercialized. One of the aspects in which both the active ingredients, as well as impurities from the manufacturing process or the metabolites found in the environment as a product of their degradation, are evaluated is their genotoxicity. The genotoxic and/or mutagenic potential of a compound is assessed in vitro by the Ames assay in bacteria, the micronucleus assay (MN), the chromosomal aberration assay (CA) and the mutagenicity assay in mammalian cells (Cell Gene Mutation - CGM). This dissertation was prepared at the Laboratory of Microbiology and Cell Biology integrated at ASCENZA AGRO, which is part of the Rovensa group. ASCENZA AGRO has a long experience in the Crop Protection sector, mainly in the production of fungicides, insecticides and herbicides. In addition to production, it’s supported by Quality, Physical-Chemistry, Synthesis, Pesticides Residues, Field Testing and the Microbiology and Cell Biology Laboratories to evaluate their products. The work consisted of carrying out tests for validation and implementation of the method for the mutagenicity test in mammalian cells, within the Good Laboratory Practices. Two studies were carried out: One for optimization and one for validation. The optimization study consisted of a 24H trial without S9, a 4H trial with S9 and a 24H trial. While the validation test was only composed of one 4H trial.
Food is essential to life, and therefore its safety and quality is extremely important, being evaluated throughout the food chain following the European Commission (EC) maxim ''From the farm to the fork''. The EC has some goals it wants to see acomplished by 2030, including reducing pesticide use and risk by 50%. Thus, products used for plant protection are subject to various legislations that require several studies so that they can be registered and commercialized. One of the aspects in which both the active ingredients, as well as impurities from the manufacturing process or the metabolites found in the environment as a product of their degradation, are evaluated is their genotoxicity. The genotoxic and/or mutagenic potential of a compound is assessed in vitro by the Ames assay in bacteria, the micronucleus assay (MN), the chromosomal aberration assay (CA) and the mutagenicity assay in mammalian cells (Cell Gene Mutation - CGM). This dissertation was prepared at the Laboratory of Microbiology and Cell Biology integrated at ASCENZA AGRO, which is part of the Rovensa group. ASCENZA AGRO has a long experience in the Crop Protection sector, mainly in the production of fungicides, insecticides and herbicides. In addition to production, it’s supported by Quality, Physical-Chemistry, Synthesis, Pesticides Residues, Field Testing and the Microbiology and Cell Biology Laboratories to evaluate their products. The work consisted of carrying out tests for validation and implementation of the method for the mutagenicity test in mammalian cells, within the Good Laboratory Practices. Two studies were carried out: One for optimization and one for validation. The optimization study consisted of a 24H trial without S9, a 4H trial with S9 and a 24H trial. While the validation test was only composed of one 4H trial.
Descrição
Palavras-chave
SEGURANÇA E QUALIDADE ALIMENTAR LEGISLAÇÃO PESTICIDAS GENOTOXICIDADE MUTAGENECIDADE MUTAGENICIDADE EM CÉLULAS DE MAMÍFERO