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Publicação
Studies of the Regulation of the MYC Oncoprotein by the VHL Tumor Suppressor Protein
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Resumo(s)
This study explored the interplay between MYC, VHL and SKP2. The MYC oncogene is dysregulated in most human cancers, the VHL tumor suppressor is lost in many kidney cancers and SKP2 is often overexpressed in cancer. Both VHL and SKP2 are E3 ubiquitin ligase components. Previous findings suggest that MYC interacts with both SKP2 and VHL in cancer cells, but the biological roles of these interactions are still unclear.
Here, we hypothesized that SKP2 and VHL might compete for MYC binding. By transient overexpression in cells followed by co-immunoprecipitation, I confirmed MYC interaction with VHL and SKP2. However, co-transfections of MYC, VHL, and SKP2 showed that SKP2 rather than competing seemed to favor formation of the MYC-VHL complex, and also interacted with VHL, suggesting possible formation of a ternary complex.
Additionally, I utilized site-directed mutagenesis to generate single and double mutations of amino acids implicated in MYC-VHL interactions based on NMR data. So far, none of these fully disrupted the interaction, but ongoing work hopefully will provide mechanistic insights into the interaction.
This research has advanced our understanding of the interplay between MYC, VHL and SKP2, and will hopefully contribute to new therapeutic possibilities for cancer treatment in the future.
Este estudo explorou a interação entre MYC, VHL e SKP2. O oncogene MYC é frequentemente desregulado na maioria dos cancros humanos, o supressor de tumor VHL está ausente em muitos cancros renais e o SKP2 é frequentemente superexpresso em cancros. Tanto o VHL quanto o SKP2 são componentes da E3 ubiquitin ligase. Estudo santeriores sugerem que o MYC interage com ambos SKP2 e VHL em células cancerígenas, mas as funções biológicas dessas interações ainda são incertas. Neste estudo, hipotetizamos que SKP2 e VHL poderiam competir pela ligação ao MYC. Por superexpressão transitente em células seguida de co-imunoprecipitação, confirmei a interação do MYC com VHL e SKP2. No entanto, co-transfeções de MYC, VHL e SKP2 mostraram que SKP2, em vez de competir, parecia favorecer a formação do complexo MYC-VHL e também interagia com VHL, sugerindo a possível formação de um complexo ternário. Além disso, utilizei mutagênese dirigida para gerar mutações únicas e duplas de aminoácidos envolvidos nas interações MYC-VHL com base em dados de RMN. Até o momento, nenhuma delas interrompeu completamente a interação, mas o trabalho em curso, esperançosamente, fornecerá conhecimentos dos mecanismos desta interação. Esta pesquisa avançou o nosso conhecimento da interação entre MYC, VHL e SKP2 e, esperançosamente, contribuirá para novas possibilidades terapêuticas para o tratamento do cancro no futuro.
Este estudo explorou a interação entre MYC, VHL e SKP2. O oncogene MYC é frequentemente desregulado na maioria dos cancros humanos, o supressor de tumor VHL está ausente em muitos cancros renais e o SKP2 é frequentemente superexpresso em cancros. Tanto o VHL quanto o SKP2 são componentes da E3 ubiquitin ligase. Estudo santeriores sugerem que o MYC interage com ambos SKP2 e VHL em células cancerígenas, mas as funções biológicas dessas interações ainda são incertas. Neste estudo, hipotetizamos que SKP2 e VHL poderiam competir pela ligação ao MYC. Por superexpressão transitente em células seguida de co-imunoprecipitação, confirmei a interação do MYC com VHL e SKP2. No entanto, co-transfeções de MYC, VHL e SKP2 mostraram que SKP2, em vez de competir, parecia favorecer a formação do complexo MYC-VHL e também interagia com VHL, sugerindo a possível formação de um complexo ternário. Além disso, utilizei mutagênese dirigida para gerar mutações únicas e duplas de aminoácidos envolvidos nas interações MYC-VHL com base em dados de RMN. Até o momento, nenhuma delas interrompeu completamente a interação, mas o trabalho em curso, esperançosamente, fornecerá conhecimentos dos mecanismos desta interação. Esta pesquisa avançou o nosso conhecimento da interação entre MYC, VHL e SKP2 e, esperançosamente, contribuirá para novas possibilidades terapêuticas para o tratamento do cancro no futuro.