Análise da infiltração celular numa matriz de nanofibras com poros expandidos

Abstract

A Engenharia de Tecidos tem explorado várias técnicas na produção de estruturas porosas tridimensionais, que permitam mimetizar as condições in vivo a que as células estão sujeitas, de modo a promover a regeneração do tecido. A técnica de eletrofiação produz membranas de fibras altamente porosas, mas com poros pequenos, que dificultam a infiltração celular. Face a este problema, pretende-se aumentar o tamanho de poro através da incorporação de grãos numa membrana eletrofiada, para expandir a rede fibrosa e permitir a migração e distribuição uniforme das células. Esta abordagem é aplicada no âmbito da regeneração da pele, visto que os substitutos comercializados não apresentam uma solução eficaz para os defeitos anatómicos, funcionais e estéticos cutâneos. Recorrendo à eletrofiação simultânea de duas soluções, foram produzidas membranas de fibras de policaprolactona, um polímero sintético biodegradável, com grãos de quitosano incorporados, um polímero natural acelerador da regeneração da pele, de granulometria e concentração variável. Posteriormente as membranas foram caracterizadas fisicamente quanto à morfologia, propriedades mecânicas, porosidade e permeabilidade ao vapor de água, e biologicamente quanto à adesão, proliferação e infiltração celular. A análise morfológica confirmou a integração dos grãos nas membranas. Segundo os ensaios mecânicos e de permeabilidade estas podem-se considerar aptas para a aplicação cutânea. Na análise porosimétrica projetou-se um sistema de montagem, que visa implementar o método do ponto de bolha, para determinar o tamanho médio de poro. Com o sistema construído realizaram-se os primeiros testes em membranas de filtros, alcançando-se valores de poro relativamente próximos aos esperados. Quanto aos ensaios in vitro, as células aderiram e proliferaram a taxas mais baixas que no controlo, e foram encontradas preferencialmente à superfície das membranas. As várias composições dos grãos nas membranas não produziram resultados diferentes, não sendo por isso um fator determinante. O trabalho realizado permitiu progressos na questão da expansão de poros de uma estrutura fibrosa.