Avaliação da emergência de marcadores moleculares de resistência ao artemeter-lumefantrina em Plasmodium falciparum de doentes com malária não complicada na Guiné-Bissau

Abstract

A Guiné-Bissau aderiu em 2008 à política de combinação terapêutica baseado em artemisinina (ACT) como a primeira linha de tratamento da malária não complicada por Plasmodium falciparum. O presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia terapêutica e a emergência de marcadores moleculares de resistência ao artemeter-lumefantrina em doentes com malária não complicado por P. falciparum, avaliar os critérios clínicos, parasitológicos e moleculares na Guiné-Bissau. O estudo de um só braço, decorreu nos 4 postos sentinela do estudo da epidemiologia da malária no país, nomeadamente: Bairro Militar em Bissau, Gabú no leste, Buba no sul e Canchungo no norte. Os participantes com suspeita de malária foram rastreados. Os casos positivos que cumpriram todos os critérios de inclusão foram tratados e seguidos durante 28 dias para avaliação dos critérios clínicos e parasitológicos. As recomendações da OMS foram usadas para a avaliação do tratamento antimalárico alocado aos doentes. Os genes pfmsp1 e pfmsp2 dos parasitas coletados dos doentes que reportaram falha clínica e ou parasitológica, foram genotipados para diferenciar episódios de recrudescência ou nova infeção. As sequências dos genes pfmdr1 e pfkelsh13 foram também obtidas para as amostras incluídas no estudo. Os dados foram analisados com recurso a World Health Organization (WHO) excel-based application. Um total de 184 doentes foram incluídos. Como base nos parâmetros clínicos e parasitológicos observados entre os dias 7 e 28 de seguimento, foram observadas 5 falhas parasitológicas tardias, 4 em Gabú e 1 em Buba. A sequenciação de pfmdr1 de P. falciparum destes 5 doentes resultou na deteção de mutações na posição 184 (Y/F) em 4 doentes e uma mutação na posição 86 (Y/F). Não foram detetadas mutações na posição 1246 (D/Y). Para o gene pfkelsh13 não foram identificadas mutações conhecidas associados à resistência aos derivados da artemisinina. O presente estudo revela a manutenção da eficácia terapêutica de artemeter-lumefantrina no tratamento da malária não complicada por P. falciparum na Guiné-Bissau, não obstante as mutações identificadas associados à tolerância à lumefantrina. Os resultados alcançados devem ser interpretados com cuidados devido ao número de amostras analisados. A monitorização continua da eficácia terapêutica, a emergência dos marcadores de resistência em futuros estudos com maior raio de ação serão importantes para o mapeamento geográfico nacional, facilitando assim as decisões de políticas terapêuticas do programa nacional de luta contra a malária baseado em evidências.

Guinea-Bissau, in 2008, introduced artemisinin-based combination therapy (ACT) as the first-line of treatment of uncomplicated Plasmodium falciparum malaria. The present study aimed to evaluate the therapeutic efficacy and the emergence of molecular markers of resistance to artemether-lumefantrine in P. falciparum from uncomplicated malaria patients, under clinical, parasitological, and molecular criteria in Guiné-Bissau. A single arm study took place in the 4 sentinel sites in the country, namely: Bairro Militar in Bissau, Gabú in the east, Buba in the south and Canchungo in the north. Participants with suspected malaria were screened, enrolled, treated, and followed for 28 days, WHO clinical and parasitological criteria were used to evaluate the outcome of antimalarial treatment allocated to patients. The pfmsp1 and pfmsp2 genes of parasites collected from patients who reported clinical and/or parasitological failure were genotyped to differentiate recrudescence from new infection. The pfmdr1 and pfkelsh13 gene sequences were also obtained from the same samples. Data were entered and analysed using the WHO excel-based application. A total of 184 patients were included. From those a total of 5 late parasitological failures was observed, 4 of Gabú and 1 of Buba, defined by the clinical and parasitological parameters observed between the 7th and 28th days of follow-up. Sequencing the pfmdr1 gene of these 5 patients resulted in the detection of mutations at position 184 (Y/F) in 4 patients, and a mutation at position 86 (Y/F), with no mutations detected at position 1246 (D /Y). For pfkelsh13 no known mutations associated with resistance to artemisinin derivatives were identified. The present study revealed that the therapeutic efficacy of artemether-lumefantrine in the treatment of uncomplicated P. falciparum malaria in Guinea-Bissau is still maintained, despite the identification of mutations associated with tolerance to lumefantrine. The results achieved must be interpreted with care due to the number of samples analysed. Continuous monitoring of therapeutic efficacy and the emergence of resistance markers in future studies with a greater geographic range are important for its national mapping, thus facilitating evidence-based therapeutic policy decisions for the national malaria control program.