A resistência a biocidas e antibióticos tópicos em Staphylococcus aureus de origem humana

Abstract

RESUMO:Staphylococcus aureus é um agente patogénico responsável por um largo espetro de infeções, incluindo infeções da pele e tecidos moles (SSTIs). Sabe-se que o uso indevido dos antibióticos leva a um aumento da resistência, mas estudos recentes mostram que os biocidas também podem ter uma contribuição importante na seleção de estirpes resistentes. O objetivo deste trabalho foi caracterizar fenotípica e molecularmente uma coleção de 34 S. aureus isolados de SSTIs, em ambulatório, quanto ao perfil de suscetibilidade aos principais biocidas e antibióticos utilizados na prática clínica, correlacionando-o com determinantes de resistência e o seu contexto genético. A suscetibilidade a antibióticos foi testada por difusão em disco, tendo sido detetada resistência à penicilina (33/34, 97,1%), fluoroquinolonas (17/34, 50%), macrólidos e lincosamidas (15/34, 44,1%), aminoglicosídeos (6/34, 17,6%) e ácido fusídico (2/34, 5,9%). Quinze isolados (44,1%) são MRSA (cefoxitinaR, mecA+). No total da coleção, 44,1% dos isolados apresentam multirresistência. Foram também identificadas diversas combinações de múltiplos genes de resistência (blaZ, erm(A), erm(C), msr(A), mph(C), aacA-aphD, aadD, aph(3’)-IIIa e fus(C). Foi ainda demonstrada a potencial localização de alguns destes genes em plasmídeos. As distribuições de halos de inibição/CMIs obtidas foram usadas para a proposta de valores de "cut-off" epidemiológicos (ECOFFs) para quatro antibióticos e seis biocidas ou metais pesados. A sua aplicação permitiu identificar populações "non wild-type" (NWT) para os antibióticos tópicos bacitracina (9/34, 26,5%) e neomicina (5/34, 14,7%), para o biocida cetrimida (3/34, 8,8%) e para os metais pesados arseniato (4/34, 11,8%) e zinco (1/34, 2,9%). Estas populações NWT foram associadas à presença de diferentes determinantes de resistência. Esta Dissertação realça a elevada frequência de resistência aos antimicrobianos em S. aureus associados a SSTIs fora do ambiente hospitalar, com particular destaque para isolados MRSA e MDR, os quais correspondem a quase metade da coleção. Os ECOFFs propostos poderão ser uma ferramenta útil para aplicação em estudos futuros de vigilância epidemiológica da resistência a estes antimicrobianos.

ABSTRACT: Staphylococcus aureus is major human pathogen responsible for a wide range of infections, including skin and soft tissue infections (SSTIs). It is known that the misuse of antibiotics leads to increased antibiotic resistance, but recent studies showed that biocides can also select for antibiotic resistant strains. The aim of this work was to perform the phenotypic and molecular characterization of a collection of 34 S. aureus isolated from SSTIs in ambulatory patients, to assess their susceptibility to the main antibiotics and biocides used in clinical practice, correlating their resistance profile to genetic determinants. Antibiotic susceptibility testing by disk diffusion detected resistance to penicillin (33/34, 97.1%), fluoroquinolones (17/34, 50%), macrolides and lincosamides (15/34, 44.1%), aminoglycosides (6/34, 17.6%) and fusidic acid (2/34, 5.9%). Fifteen isolates (44.1%) were MRSA (cefoxitinR, mecA+) and fifteen were multidrug resistant (MDR). Several combinations of multiple antibiotic resistance genes were identified (blaZ, erm(A), erm(C), msr(A), mph(C), aacA-aphD, aadD, aph(3’)-IIIa and fusC), as well as their location in plasmids. Epidemiological cut-off (ECOFF) values based on distributions of inhibition zones and minimum inhibitory concentrations were proposed for four antibiotics and six biocides or heavy metals. Their application identified non wild-type (NWT) populations for the topical antibiotics bacitracin (9/34, 26.5%) and neomycin (5/34, 14.7%), for the biocide cetrimide (3/34, 8.8%) and for the heavy-metals arsenate (4/34, 11.8%) and zinc (1/34, 2.9%). Several resistance genes were detected in association with these NWT populations. This work highlights the high frequency of antimicrobial resistance among S. aureus causing SSTIs outside the hospital environment, with particular focus on MRSA and MDR isolates, which corresponded to nearly half of the collection studied. The ECOFFs proposed may provide a valuable epidemiological tool for future surveillance studies on antimicrobial resistance in S. aureus.