Aplicação clínica da expressão de biomarcadores moleculares no carcinoma urotelial da bexiga não músculo-invasivo

Abstract

RESUMO - Introdução: O carcinoma urotelial da bexiga constitui um importante problema de Saúde Pública pela sua incidência e prevalência, ocupando o segundo lugar entre as neoplasias urológicas e situando-se entre as dez neoplasias mais frequentes. A avaliação histopatológica do tecido tumoral continua a ser gold standard na fase do diagnóstico e têm profundas implicações no tratamento e no prognóstico da doença. No entanto, os fatores de prognóstico clássicos apresentam limitações preditivas a nível individual num tempo em que a medicina personalizada surge como o paradigma para os próximos anos. É particularmente importante, na área oncológica, a integração de biomarcadores moleculares com capacidade de estabelecer prospectivamente a agressividade, a probabilidade de recorrência, o risco de progressão da doença e precisar o prognóstico e tratamento personalizados. Materiais e métodos: O projeto de investigação tem por base um estudo observacional retrospetivo de uma coorte clínica constituída por 147 doentes com o diagnóstico de carcinoma urotelial da bexiga não músculo-invasivo (Ta e T1) recrutados no Hospital Reina Sofia em Córdoba entre 2002 e 2014. Foram avaliados fatores de prognóstico clinico-patológicos e a expressão de biomarcadores moleculares relativamente aos outcomes no final do período de seguimento. Estudamos a expressão do Ki-67, p53, p21, p27, ciclina D1 e ciclina D3, Bax, Bcl-2, caspase 3, ErbB-2, CD 44, CK 5/6 e CK 20. Com base na expressão de CK 5/6 e CK 20 desenvolvemos um classificador de fenótipo molecular com quatro fenótipos: Nulo (CK5/6-, CK20-), Misto (CK5/6+, CK20+) Basal (CK5/6+, CK20-) e Luminal (CK5/6-, CK20+). Os resultados de interesse primário para o estudo são a recorrência e o tempo até à primeira recorrência da doença, a progressão e o tempo até à progressão da doença, a ocorrência de morte específica pela doença e o tempo até à ocorrência da morte específica da doença. Resultados: Dos 147 doentes incluídos no estudo com um período de seguimento mediano de 76 meses, 17 do sexo feminino e 130 do sexo masculino com uma mediana de idades de 68 anos. Cerca de 75% (n=110) dos tumores foram classificados Ta (AJCC/TNM 2016) e 65% (n=95) eram tumores de alto grau (OMS 2004/2016). Na análise multivariável, são fatores de prognóstico independentes na recorrência o grau histológico (HR: 3,005) e o fenótipo luminal (HR: 2,307); são fatores independentes de progressão tumoral o grau histológico (HR: 10,245), a ciclina D3 (HR: 4,476), Bax (HR: 0,155), Bcl2 (HR: 0,289), o fenótipo basal (HR: 6,271) e o fenótipo luminal (HR: 15,981). Relativamente à morte específica da doença são fatores de prognóstico independentes o diâmetro do tumor (HR 5,134), o grau histológico (HR: 11,635), o Bax (HR: 0,062), Bcl2 (HR: 0,280), o fenótipo basal (HR: 7,881) e fenótipo luminal (HR: 24,893). Conclusões: O nosso estudo mostra que a graduação do fenótipo molecular é viável e estratifica os doentes com CUBNMI em categorias prognósticas potencialmente preditivas de recorrência, progressão e morte específica pela doença, particularmente nos tumores de alto grau.

ABSTRACT - Introduction: Urothelial bladder cancer is a public health issue, due to its incidence and prevalence. It is the second most common urological malignancy and it is amongst the 10 more common tumors worldwide. Pathology evaluation is the gold standard for establishing diagnosis and has important treatment and prognosis implications. Nevertheless, histology has predictive drawbacks. Personalized medicine might be a path to overcome them, namely using molecular biomarkers, to highlight disease aggressiveness, recurrence probability and prognosis, thus providing the basis for individualized treatment. Materials and methods: In a retrospective clinical cohort study, we evaluated 147 consecutive patients, with non-invasive (“pTa” and “pT1”) urothelial bladder carcinoma (NMIBC), treated at the Urology Service from Hospital Reina Sofia in Cordoba, between 2002 and 2014. The diagnosis was established by pathology. Several clinical, pathological and molecular biomarkers (Ki-67, p53, p21, p27, cyclin D1, cyclin D3, Bax, Bcl-2, caspase-3, CD44, CK5/6 and CK 20) were evaluated. In order to further refine the predictive impact of molecular biomarkers, we created a “molecular phenotype classifier” based on CK 5/6 and CK 20 expression (“Null: CK5/6-, CK20-”; “Mixed: CK5/6+, CK20+”; “Basal: CK5/6+, CK20-”; and “Luminal: CK5/6-, CK20+”). The study outcomes were disease recurrence, time to first disease recurrence, progression, time to progression, disease-specific mortality and time to disease-related death. Results: In our sample there were 17 females and 130 males. The median age was 68 years. Around three quarters (n=110) were classified as “pTa” (AJCC/TNM 2016) and 65% (n=95) as “high-grade” (WHO 2004/2016). In multivariable analysis, both histological grade (HR=3.005) and “Luminal” phenotype (HR=2.307) were independent predictive factors for disease recurrence. Histological grade (HR=10.245), cyclin D3 (HR4.406), BAX (HR=0.155), Bcl-2 (HR=0.289), “Basal” phenotype (HR=6.271) and “luminal” phenotype (HR=15.981) were all independent predictive factors for disease progression. Tumor size (HR=5.134), histological grade (HR=11.635), Bax (HR=0.062), Bcl-2 (HR=0.280), “Basal” phenotype (HR=7.881) and “Luminal” phenotype (HR=24.893) were all independent predictive factors for disease-specific mortality. Conclusions: Our study shows that using this “phenotypic classifier” is feasible and accurately stratifies NMIBC patients, according to disease recurrence, disease progression and disease-specific mortality, namely in high-grade tumors.