A carregar...
Publicação
Uma abordagem a sistemas de crescimento celular apical: síntese de um sensor para iões citosólicos de potássio
| Nome: | Descrição: | Tamanho: | Formato: | |
|---|---|---|---|---|
| 3.82 MB | Adobe PDF |
Autores
Orientador(es)
Resumo(s)
Este trabalho descreve os estudos realizados no desenvolvimento de um sensor fluorescente,
solúvel em água, com potencial aplicação na quantificação de iões de potássio citosólicos. O sensor fluorescente de iões de potássio, ou PBFI/Dextrano, é constituído por duas unidades estruturais:
dextrano 9,000-11,000 Da (produzido pela bactéria Leuconostoc mesenteroides) ligado, através de uma função éster, ao indicador fluorescente PBFI (Potassium - binding benzofuran isophtalate). O PBFI é um fluoroionóforo formado por duas sub - unidades de benzofuranoisoftalato e pelo ionóforo 18-diazocoroa-6, obtido através da síntese convergente de uma unidade de 4,4’-(1’’,4’’,10’’,13’’-tetraoxa- 7’’,16’’-diazociclo-octadecano 7’’,16’’-di-il) bis(5-metoxi 2-hidroxibenzaldeído) a duas unidades
de 4-metilbromo-isoftalato de dimetilo por um processo de duas etapas por tratamento com carbonato de potássio em diferentes solventes. Obteve-se uma mistura de sais de carboxilatos de potássio e ésteres metílicos, com uma média de duas unidades de potássio por molécula. A sua estrutura foi
determinada por ressonância magnética nuclear, espectrometria de massa de MALDI-TOF e espectroscopia de emissão atómica (ICP-AES). A fluorescência do indicador foi analisada por espectroscopia de Ultravioleta / Visível. Esta última permitiu retirar informações sobre a absorção e emissão da amostra. O sensor fluorescente PBFI/Dextrano foi obtido pela condensação do PBFI, através do seu grupo funcional carboxilato, à unidade de dextrano por uma transformação de dois passos: activação do carboxilato através do seu derivado de benzotriazole seguido da condensação com o dextrano. Depois de determinada a estrutura do sensor, pelas técnicas mencionadas anteriormente, fez-se um estudo de fluorescência usando as mesmas condições, descritas na literatura, para o PBFI. Verificou-se um máximo de emissão fluorescente a 553 nm (601 nm no caso do
indicador PBFI) e observou-se, através do espectro de excitação fluorescente, que a intensidade do sinal aumenta com o aumento da concentração de K+. O sensor mostrou ser sensível a uma gama de concentrações de soluções tampão contendo iões potássio.
Descrição
Dissertação para obtenção do Grau de Mestre
em Bioorgânica