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Contributo para a caracterização molecular de Echinococcus granulosus em Portugal

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Resumo(s)

A Equinococose/hidatidose – doenƧa causada pela fase larvar (hidĆ”tide – vulgarmente conhecida como quisto hidĆ”tico) docesto de Echinococcus granulosus – Ć© uma das zoonoses mais comuns e encontra-se entre as de maior importĆ¢ncia mĆ©dica e veterinĆ”ria. Tem uma ocorrĆŖncia em ecossistemas variados e a boa adaptação do parasita a diversos hospedeiros contribui para a biodiversidade, com o aparecimento de variaƧƵes genĆ©ticas intraespecĆ­ficas ou ā€œestirpesā€. De facto, vĆ”rios estudos demonstraram a existĆŖncia de dez diferentes estirpes/genótipos (G1 a G10) vindo, assim, confirmar a diferenciação efectuada por critĆ©rios morfológicos, biológicos e bioquĆ­micos. A caracterização molecular tem permitido clarificar a epidemiologia e melhorar o controlo desta zoonose, em diferentes paĆ­ses. A maioria das estirpes conhecidas de E. granulosus pode infectar os humanos (principalmente a G1, mas tambĆ©m G2, G5, G6, G7, G8 e G9) com maior ou menor gravidade. O principal objectivo deste estudo Ć© identificar os genótipos de E. granulosus circulantes nos hospedeiros intermediĆ”rios, em Portugal, dado que nĆ£o existe ainda nenhum estudo molecular sobre identificação de estirpes deste parasita, em Portugal. As amostras foram isoladas de fĆ­gados e pulmƵes, recolhidos em matadouros, a partir de animais domĆ©sticos, como ovinos e bovinos, na regiĆ£o centro de Portugal. Foi feita a extracção de DNA de todas as amostras e, este, foi submetido a tĆ©cnicas moleculares com base na amplificação da regiĆ£o ITS-1 (ITS1-PCR), Eg9-PCR e Eg16-PCR, Ć s quais foram aplicadas diferentes enzimas tais como a Rsa I, a Cfo I, a Msp I e a Taq I. Para confirmação foi feita, posteriormente, a sequenciação de uma regiĆ£o do genoma mitocondrial que codifica o gene citocromo oxidase c subunidade 1 (COI). Os resultados obtidos mostraram que o genótipo presente nas amostras estudadas (de ovinos e bovinos) Ć© o G1 (estirpe ovina). Devido ao reconhecimento desta estirpe como infecciosa para os humanos, a presenƧa da mesma em Portugal demonstra a importĆ¢ncia que a hidatidose pode assumir como problema de saĆŗde pĆŗblica.
Cystic echinococcosis – caused by the larval stage (hydatic cyst) of the cestode Echinococcus granulosus - is one of the most widespread zoonoses of veterinary and medical importance. Numerous studies have shown that E. granulosus exists as a complex of strains differing in a wide variety of criteria. Ten distinct genotypes (G1-G10) have been identified with impact on pathology, epidemiology and control of cystic hydatic disease. Our main objective was to identify Portuguese genotypes of E. granulosus. In Portugal, no molecular genetic typing study has been carried out to clearly identify the putative strains transmitted. Parasite samples were isolated from liver and lung, in slaughterhouses, from domestic animals such as sheep and cattle, from many regions of Portugal. The samples were submitted to molecular technics using ITS1-PCR, Eg9-PCR, Eg16-PCR and Eg9-PCR linked restriction fragment length polymorphism (RFLP). Some samples were submitted to the sequenciation using primers for COI gene. The only strain identified was G1 (Sheep strain). Since this is the most infectious strain for humans we are in front of public health problem.

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Palavras-chave

Microbiologia médica Biologia molecular Hidatidose Echinococcus granulosus Caracterização molecular

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