Publicação
Estudos estruturais de interacções proteína-ligando: aldeído oxidorredutase e tripsina
| dc.contributor.advisor | Santos-Silva, Teresa | |
| dc.contributor.author | Correia, Hugo David Cancela | |
| dc.date.accessioned | 2013-06-05T10:19:47Z | |
| dc.date.available | 2013-06-05T10:19:47Z | |
| dc.date.issued | 2012 | |
| dc.description | Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Bioquímica Estrutural e Funcional | por |
| dc.description.abstract | O conhecimento e compreensão das interacções entre proteínas e ligandos é muitas vezes a base para a resolução de questões complexas a nível biológico. Na presente dissertação são estudadas as proteínas Aldeído Oxidorredutase de Desulfovibrio gigas (DgAOR) e a tripsina de Bos taurus com vários ligandos por Cristalografia de Raios-X. A DgAOR é uma enzima de molibdénio da família da Xantina Oxidase que apresenta a função de catalisar a hidroxilação oxidativa de aldeídos a ácidos carboxílicos. Com o objectivo de se perceber qual a diferença entre as formas activa e inactiva desta enzima, foram realizados estudos cinéticos com ditionito de sódio e sulfureto de sódio, reagentes utilizados na activação de proteínas da mesma família. Os resultados mostraram uma activação inicial seguida de uma inactivação. O modelo cristalográfico determinado nas mesmas condições sugere uma molécula de peróxido de hidrogénio ligada ao átomo de molibdénio do centro activo. Quando comparada com a estrutura obtida usando apenas peróxido de hidrogénio, as semelhanças são notórias reforçando a presença desta espécie a bloquear o centro activo. De modo a elucidar o mecanismo de reacção da enzima, foram executados estudos com diferentes aldeídos, tendo-se observado a interacção entre o cofactor e os substratos, nalguns casos originando os produtos da reacção. A tripsina é uma protease de serina que catalisa a hidrólise de ligações peptídicas. Esta foi utilizada como modelo cristalográfico para o estudo de interacções com cinco compostos desenhados para a inibição da urocinase, uma enzima muito semelhante, da mesma família. Foram obtidas estruturas com os compostos AB1 e JS62 ligados ao centro activo permitindo a visualização das interacções entre estes e os resíduos chave da proteína. O composto AB11 não se ligou à proteína, enquanto que, para os restantes dois compostos, JS67 e SR5, obteve-se densidade electrónica de difícil interpretação no centro activo. | por |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10362/9793 | |
| dc.language.iso | por | por |
| dc.publisher | Faculdade de Ciências e Tecnologia | por |
| dc.subject | Cristalografia de raios-X | por |
| dc.subject | Cinética enzimática | por |
| dc.subject | Interacções proteína-ligando | por |
| dc.subject | Aldeído oxidorredutase | por |
| dc.subject | Tripsina | por |
| dc.subject | Espécies reactivas de oxigénio | por |
| dc.title | Estudos estruturais de interacções proteína-ligando: aldeído oxidorredutase e tripsina | por |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | por |
| rcaap.type | masterThesis | por |