Implementação e Validação do Método Horizontal de Deteção de Escherichia coli O157:H7 em carnes

Abstract

Escherichia coli O157:H7 é um agente patogénico emergente, associado com o decorrer de inúmeros surtos de origem alimentar um pouco por todo o mundo. Na origem desses surtos estão associados vários alimentos: leite, legumes crus tais como alfaces e espinafres, no entanto, a carne tem sido reportada como o principal veículo de transmissão desta estirpe. O contato pessoa-pessoa e a ingestão de água contaminada são também outras formas de contágio associadas ao dito microrganismo. A sintomatologia das infeções causadas por E. coli O157:H7 pode variar desde diarreias leves a severas e sanguinolentas, podendo em alguns casos mais graves evoluir para o Síndrome Urémico Hemolítico. A carne é um meio ideal para o crescimento de microrganismos devido à sua composição. Aliado a este facto, a elevada manipulação com baixo padrão higiénico-sanitário pode ter um importante contributo na sua inocuidade facilitando o crescimento e desenvolvimento microbiano. Desta forma, este trabalho teve como principal objetivo a implementação e validação do Método Horizontal de Deteção de Escherichia coli O157:H7, com algumas alterações, em 15 amostras de carne (ISO 16654-2001). No referido método foi utilizado o caldo de triptona de soja modificada com a adição de novobiocina (mTSB+N) como meio de enriquecimento. Posteriormente procedeu-se à inoculação nos meios seletivos CT-SMAC e chrom ID O157:H7 onde foi avaliada a presença de colónias características. Entre as 15 amostras, três foram identificadas com a presença de colónias típicas do microrganismo, pelo que se seguiram testes confirmativos, nomeadamente a produção de indol (positiva) e a aglutinação com anti-soro para E. coli O157:H7 (positivo). Paralelamente a este método foi realizado o método de PCR e VIDAS® UP E. coli O157 (including H7) (ECPT), atualmente em vigor no laboratório da SGS, de forma a averiguar a concordância de resultados entre as três metodologias.