Caracterização de dois novos tipos de centros ferro-enxofre em duas proteínas isoladas de bactérias redutoras de sulfato (desulfovibrio gigas NCIB 9332)

Abstract

As bactérias redutoras de sulfato têm uma cadeia de transferência electrónica complexa, que conduz à redução do sulfato através da oxidação de substâncias orgânicas ou de hidrogénio melecular. Isolaram-se e caracterizaram-se duas proteínas, isoladas de um organismo redutor de sulfato (Desulfovibrio gigas),contendo dois novos tipos de centros ferro-enxofre: a desulfore doxina, com um centro de lFe, semelhante ao da rubredoxina, e a ferredoxina II, com um centro [3Fe,x~ recentemente também identificado numa ferredoxina de Azotobacter vinelandii. A presença de ferro nestas proteínas permite a aplicação de técnicas espectroscópicas,de modo a que possa ser obtida informação estrutural(nomeadamente ressonância magnética nuclear (RMN), ressonância paramagnética electrónica (RPE) e espectroscopia de Môssbaueo. A desulforedoxina é um novo tipo de proteína contendo ferro nao hémico sem enxofre lábil. A proteína é isolada como um dímero, de peso molecular 7 900, consistindo de duas subunidades idênticas, com um átomo de ferro e quatro cisternas por monómero. A composição de ácidos aminados é invulgar, pois no total estão ausentes sete ácidos aminados (arginina, histidina, tripto fano, serina, prolina, isoleucina e fenilalanina). Determinou-se a sequência em ácidos aminados da desulfore doxina. A elucidação da sequência foi obtida por degradação da proteina inteira no sequenciador de proteínas e pela determinação da sequência dos peptídeos, obtida pela digestão com a protease de Staphylococus aureus.