http://hdl.handle.net/10362/1053 DCV_MA 2013-06-18T23:04:31Z http://hdl.handle.net/10362/9710 Title: Ocorrência, diagnóstico molecular e resistência a antifúngicos de Candida sp. de infecções vaginais em Portugal e Cabo-Verde Authors: Silva, Zita Dinis Lopes da Abstract: As leveduras Candida sp. encontram-se entre os principais agentes patogénicos causadores de infecções fúngicas vaginais, sendo Candida albicans a espécie mais frequente. Contudo, a realidade em África quanto à sua prevalência como agentes infecciosos é praticamente desconhecida, incluindo em Cabo-Verde onde é totalmente incógnita. Neste trabalho foram estudados 142 isolados clínicos de duas proveniências: Portugal e Cabo-Verde. C. albicans foi a espécie mais prevalente (85% e 69%, respectivamente), estando Candida glabrata em segundo lugar entre os isolados de Portugal (8%) e Candida parapsilosis entre os isolados de Cabo-Verde (19%). Verificou-se a importância da utilização dos métodos moleculares (PCR multiplex e PCR-RFLP) que demonstraram ser simples, mais rápidos e eficazes, possíveis de ser aplicados em rotina nos laboratórios de microbiologia, nomeadamente laboratórios hospitalares por actualmente já não serem muito dispendiosos. A pesquisa da nova espécie C. africana entre os isolados clínicos de Cabo-Verde, mostrou a presença de quatro isolados desta espécie. Apesar de neste trabalho se ter verificado uma elevada sensibilidade dos isolados clínicos dos dois países ao fluconazol e ao voriconazol, nestes últimos anos tem-se verificado um aumento de resistência das espécies de Candida aos antifúngicos azólicos, envolvendo a acção do gene ERG11. Procurou-se, deste modo, pesquisar a existência de mutações ao nível deste gene, bem como procurar alternativas aos antifúngicos convencionais pesquisando novas opções de actividades antifúngicas a partir de plantas medicinais. A análise feita às sequências do gene ERG11 envolvido na resistência aos fármacos demonstrou existirem diferenças entre os isolados sensíveis e os resistentes aos azóis fluconazol e voriconazol. Foram ainda testados óleos essenciais, onde os de Lavandula latifolia,Melaleuca alternifolia, Rosmarinus officinalis apresentaram acção antifúngica. Com este trabalho foi, por fim, possível conhecer parte da realidade cabo-verdiana quanto à prevalência de leveduras Candida sp. como agentes de vulvovaginite. Description: Dissertação para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina 2013-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10362/9655 Title: Distribuição de macroalgas nativas e exóticas no substrato duro subtidal do porto de Sines Authors: Celestino, Susana de Fátima Preciso Abstract: Tendo em conta o potencial impacte de espécies introduzidas em ambientes marinhos, observações de algas exóticas realizadas em estudos anteriores sobre o substrato duro subtidal do Porto de Sines e o facto de este porto ter um intenso tráfego marítimo que inclui navios e outras embarcações provenientes de diversas regiões longínquas, foi estudada a abundância e distribuição de macroalgas exóticas em substratos duros subtidais do porto de Sines, dando especial atenção à macroalga exótica Asparagopsis taxiformis e incluindo o estudo da distribuição de macroalgas nativas. A amostragem deste estudo foi realizada em mergulho com escafandro autónomo e decorreu no Verão de 2004. Com o objectivo de estudar a abundância e a distribuição espacial de A. taxiformis, foi feita uma procura exaustiva desta espécie a uma profundidade de 3 a 10 m em 9 áreas dentro do porto de Sines. Esta espécie foi encontrada com maior abundância no porto de recreio, onde foi estimada quantitativamente a sua percentagem de cobertura, sem recurso a amostragem destrutiva. Com vista ao estudo da distribuição espacial de algas exóticas e nativas no porto de Sines, foram amostradas 6 áreas a uma profundidade de 3 a 6 m. Em cada área, foi amostrada destrutivamente a cobertura de macroepibentos. A alga exótica Asparagopsis taxiformis apenas foi encontrada em duas das nove áreas amostradas. Foi no porto de Recreio que a sua abundância foi mais elevada atingindo, no máximo, 24% de cobertura. No estudo da distribuição espacial de macroalgas exóticas e nativas, foram encontradas três espécies exóticas: Antithamnionella ternifolia, Colpomenia peregrina e Falkenbergia rufolanosa. Neste estudo, as análises multivariadas da estrutura de comunidades de macroalgas revelaram diferenças significativas entre as áreas. Excepto no caso da alga C. peregrina, em que atividades de aquacultura terão sido as principais responsáveis pela sua introdução na costa portuguesa, os vectores de introdução de A. ternifolia, A. taxiformis e F. rufolanosa nesta costa deverão estar relacionados com a utilização de navios e outras embarcações. Description: Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Ecologia, gestão e modelação de recursos marinhos 2013-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10362/9318 Title: Preparation of gas-filled porous microparticles (GPPs) and microbubbles (MBs) by PGSS method Authors: Lopes, Daniel Deodato Abstract: The main goal of this Project was the development of microbubbles (MBs) and gas-filled porous particles (GPPs) by supercritical fluids (SCF) processes, namely particles from gas saturated solution (PGSS). MBs of perfluorcarbons (PFC) are currently used as contrast agents in ultrasound imaging and as ultrasound-guided drug delivery for targeted therapeutic applications. They are normally produced by processes that present some limitations. The SCF processes are an innovative technology for the production of these MB’s that has not yet been exploited and can overcome these limitations. Carriers are used to prevent rapid diffusion of the gas out of the particle. In the first part of this thesis, a preliminary selection of carrier materials was carried out, including lipids of different hydrophilic-lipophilic balance (HLB) and hydrophilic polymers. Their behavior in the presence of PFC and mixtures of PFC and sc-CO2 was qualitatively studied. A lipid of high HLB value, Gelucire 50/13, was selected to produce the GPPs by PGSS. Main parameters of the process, temperature and pressure, were studied in the range from 55ºC to 80ºC and from 8,5 MPa to 15,4 MPa. Besides, the carrier:PFC ratio and the molecular structure of the PFC were investigated. Particle morphology was analyzed by Scanning Electron Microscopy (SEM), and the presence of PFC was determined by Nuclear Magnetic Resonance (NMR). Small and non agglomerated particles were obtained at 80ºC and 8.5 MPa. Cyclic C4F8 was entrapped in lipid particles in higher amount than of linear C3F8. Nevertheless, the stability of particles obtained at the best operating conditions (80ºC and 8.5 MPa), was relatively short (below 3h) being the majority of the gas released in the first hour. Description: Dissertation to obtain the Master Degree in Biotechnology 2012-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10362/9297 Title: Produção de partículas semelhantes a retrovírus como candidatas a vacina para a Hepatite C Authors: Almeida, Ana Isabel Matos de Abstract: Vírus da Hepatite C (HCV) infeta mais de 170 milhões de pessoas em todo o mundo, sendo uma das principais causas de cancro do fígado. Como tal, é extremamente importante e desejável a criação de uma vacina. Recentemente têm vindo a ser desenvolvidas e comercializadas vacinas baseadas em partículas semelhantes a vírus (VLPs) capazes de estimular respostas humorais e celulares eficientes. Os objetivos deste trabalho consistiram no melhoramento de linhas celulares produtoras de VLPs derivadas de retrovírus e no melhoramento da qualidade das partículas virais, com o intuito de produzir VLPs candidatas a vacina para a hepatite C. Para tal, utilizaram-se duas metodologias. Um sistema de troca de cassette (RMCE), que é um sistema versátil e rápido para o desenvolvimento de linhas celulares, permitindo obter uma elevada expressão de um gene de interesse, tendo sido utilizado para expressar os epítopos do HCV. Testaram-se dois sistemas, um mediado pela enzima Cre e outro mediado pela enzima Flipase. Para o melhoramento da qualidade das partículas utilizou-se a metodologia de silenciamento por RNAi para eliminar a incorporação da tetraspanina CD63, uma vez que a presença desta proteína nas VLPs poderá desencadear respostas imunológicas inespecíficas. Verificou-se que o sistema de troca de cassette mediado pela enzima Cre não foi eficiente nas condições experimentais utilizadas, não tendo sido possível produzir VLPs pseudotipadas com os epítopos do HCV. No sistema mediado pela enzima Flipase a troca de cassette foi eficiente obtendo-se clones que expressam as proteínas E1 e E2, para a produção de VLPs pseudotipadas com o envelope do vírus HCV. Em relação ao silenciamento da tetraspanina CD63 apesar de serem testadas diversas condições, a percentagem de silenciamento obtida foi muito reduzida e instável, concluindo-se não ser possível realizar o silenciamento desta proteína através das sequências utilizadas. Description: Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina 2012-01-01T00:00:00Z